学习目标

掌握临床分子生物学检验概念，基因多态性分析概念，个体化医学概念，循环游离核酸检测意义。

熟悉常见的临床分子生物学检验技术，临床分子生物学检验技术在病原生物基因组、基因变异、基因多态性和循环游离核酸上的应用。

了解分子生物学概念，临床分子生物学检验技术的发展。

（一）概念

临床分子生物学检验是临床分子生物学的重要组成部分，分子生物学技术应用于临床医学检验与诊断的实践，使临床医学检验技术从细胞形态学水平、代谢与酶学水平、免疫血清学水平发展到基因分子水平，并有力推动临床医学检验从以疾病为中心向以健康为中心转化、以标本为中心向以患者为中心转化、以数据为中心向以信息的临床转化为中心发展。

（二）分子生物学检验技术在临床上的应用

分子生物学检验技术在临床上的应用主要包括以下几个方面：

1、病原生物基因组

① 菌种鉴定；

② 确定病毒感染和病毒载量；

③ 病毒分析；

④ 细菌耐药监测和分子流行病学调查。

2、基因变异

① 致病基因的分子缺陷；

② 线粒体基因突变；

③ 肿瘤相关基因；

④DNA 重排形成融合基因。

3、基因多态性

① 基因定位和遗传病相关性分析；

② 药物代谢酶与血药浓度；

③ 疾病诊断和遗传咨询；

④ 多基因病的研究；

⑤ 器官移植配型和个体识别。

4、循环游离核酸

① 循环游离核酸与肿瘤；

② 游离核酸与产前诊断；

③ 循环 microRNA 与肿瘤诊断。

（三）名词解释

基因多态性分析：

是基因组研究的重要手段，数年前完成的举世瞩目的人类基因组计划即是用分析遗传标志的多态性作为研究的主要手段。

循环游离核酸：

是存在于人体体液中的细胞外游离状态的核酸，包括循环 DNA 和循环 RNA，与生理和病理状态下的细胞代谢密切相关。循环 DNA 和 RNA 水平的检测在产前诊断、恶性肿瘤早期诊断和病程监测等方面具有十分重要的意义。

个体化医学：

是现代医学的核心目标，包含个体化诊断与个体化治疗两个部分，个体化诊断是个体化治疗的基础，个体化治疗是个体化诊断的目的。

临床分子生物学检验：

采用分子生物学的方法和技术检测人体内生物大分子的变化，从而辅助疾病诊断。

（四）简答题

简述临床分子生物学检验技术发展经历的四个阶段。

第一阶段：以导致遗传病的基因突变位点的检测为靶标，以 DNA 分子杂交为核心技术，灵敏度低。

第二阶段：以 PCR 技术为核心技术，并由此衍生出的许多检测技术和方法，如 PCR-RFLR、等位基因特异性 PCR、PCR-SSCP、定量 PCR 技术等。PCR 技术由于其特异性高、灵敏度高、操作简便快捷、适用性强等特点，在临床分子生物学检验中得到极为广泛的应用。

第三阶段：以生物芯片（biochip）技术为代表的高通量密集型技术，具有样品处理能力强、用途广泛、自动化程度高等特点，具有广阔的应用前景和商业价值。

第四阶段：指 DNA 测序技术和生物质谱技术的成熟。

简述基因多态性分析的意义。

基因多态性分析是基因组研究的重要手段，主要包括以下几个方面：

（1）基因定位和遗传病相关性分析：推测所研究的遗传标志和某个遗传病易感位点的关联程度。

（2）药物代谢酶与血药浓度：检测这些多态性可用来预测这个酶对于药物代谢的敏感性和代谢速率。

（3）疾病诊断和遗传咨询：通过分析基因内或基因外的多态性标志位点并判断这些标志位点与致病基因是否存在紧密的连锁关系而达到诊断的目的。

（4）多基因病的研究：主要是检测相关基因的多态性从而了解疾病的发生机制、疾病的分类、靶器官损伤情况、指导个体化用药和评估病情预后等。

（5）器官移植配型和个体识别。

简述循环游离核酸检测的意义。

循环 DNA 和 RNA 水平的检测在产前诊断、恶性肿瘤早期诊断和病程监测等方面具有十分重要的意义。最近还发现在血浆中存在稳定的 microRNA，也可以作为潜在的分子标志物。

（1）循环游离核酸与肿瘤：游离循环 DNA 可以对肿瘤治疗和病程进行监测，是潜在的肿瘤早期诊断和预后判断的分子标志物。

（2）游离核酸与产前诊断：孕妇外周血中的游离 DNA 是开展无创性产前诊断较佳的分子标志物，可用于胎儿性别鉴定、非整倍体检测和单基因遗传病的检测等。

（3）循环 microRNA 与肿瘤诊断：microORNA 与肿瘤的发生、发展有着极为密切的关系，miceroRNA 在肿瘤中表达失调，且具有组织特异性，而且在血液中有异常高的稳定性。

简述临床分子生物学检验在复杂性疾病中的应用。

（1）在感染性疾病中，对微生物感染作出确诊，对感染性病原体进行分型和耐药性监测。

（2）通过患者的 DNA. RNA、染色体、蛋白质和某些代谢产物来揭示与遗传病发生相关的生物学标记，从而对遗传性疾病进行早期预防、早期诊断和早期治疗。

（3）用分子生物学检验方法寻找特异性肿瘤基因型标志进行肿瘤基因检测，有利于肿瘤的早期发现和诊断，以及肿瘤的预防和治疗。

（4）推动个体化医学的发展。